组氨酸标签是应用最为广泛的蛋白纯化标签。其优点包括标签尺寸小、低免疫原性、在蛋白自然和变形状态下都保持有效性，在去污剂以及多种添加剂成分环境下均保持有效等多方面优势。为了进一步提高纯化体系在纯化过程中的稳定性，德国Cube Biotech生物公司现新推出了新型PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose系列产品。这款新型的填料是以高交联度且平均直径为100 µm的琼脂糖为基材，其可用于更高流速要求的重力柱纯化和FPLC方面应用。

PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose系列采用了全新专利保护的INDIGO配基。这款产品能够在20 mM DTT和20 mM EDTA环境下稳定纯化带有组氨酸标签的蛋白（图1）。和其它市面上同类产品比较，PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose的也具有更高的蛋白结合能力。

图1： PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose 适用于 20 mM EDTA和20 mM DTT环境体系. SDS-PAGE显示通过E.coli 表达的GFP通过 PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose纯化（纯化体系含有20 mM EDTA和20 mM DTT）获得很高的产量(>80 mg/ml) 及很高的纯度。

这款新型的INDIGO配基不会被EDTA洗脱，也不会在清洗的过程中被高pH的NaOH破坏。在不需要任何重生的前提下，PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose在被反复使用8次以上，而其纯化的效率却没有任何降低（图2）。

图2：PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose 可被反复使用多次而无须再生，纯化效率并无明显变化。 8份同样含有GFP样品通过1 ml PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose进行纯化8轮纯化。每轮之间纯化体系只简单使用缓冲液清洗（PBS 和10 mM咪唑）。 M: 参照, L: 细胞裂解液, S: 含有GFP的细胞裂解液.

为了方便在纯化后用Western Blot实验验证组氨酸标签蛋白，我们也提供高特异性组氨酸抗体—PentaHis antibody. 

PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose系列产品优势：

l 在环境中稳定，实用pH为4-9

l 高结合率（高达８０ mg/ml）和高纯度

l 可直接适用于真核细胞培养液

针对pull-down实验，德国Cube Biotech生物公司同时提供新型PureCube INDIGO Ni-MagBeads磁性微球系列。此系列同样系列采用了全新专利保护的INDIGO配基并结合镍离子。此系列产品在高达20 mM DTT 和 20 mM EDTA环境体系里具有很高的目标蛋白结合能力（图3）。每批PureCube INDIGO Ni-MagBeads浓度为25%。

图3：使用 PureCube INDIGO Ni-MagBeads来纯化组氨酸标签蛋白，即使在高达10 mM DTT和 20 mM EDTA的环境下仍可以得到很高的产量和纯度：15 mL E.coli 细胞裂解液含有重组绿色荧光蛋白（GFP）和人 JNK1蛋白通过 250 µL PureCube INDIGO Ni-MagBeads 纯化。 整个实验过程中使用的缓冲液含有 10 mM DTT 和 20 mM EDTA。每毫升磁珠最终纯化总量 89 mg 的GFP 和48 mg JNK1 。（MW: 分子量.; E1-E3: 洗脱部分 1-3）